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lipo2000最新版_lipo2000作用原理(2024年11月实测)

内容来源：特快SEO所属栏目：导读更新日期：2024-11-28

lipo2000

外泌体作为天然的纳米级细胞外囊泡，因出色的生物相容性、稳定性、长效的体内循环时间以及精准的组织靶向能力，逐渐成为优化RNA递释的研究热点。然而，天然外泌体进入细胞主要依赖内吞作用，导致RNA分子易在溶酶体中被迅速降解，限制了其递释效率。中国科学院科学家团队采用外泌体工程化可控修饰策略，定量化调控了不同种类外泌体中胆固醇的含量如牛奶外泌体、生姜外泌体、肿瘤细胞来源的外泌体等，并利用透射电子显微镜等技术对其进行了全面表征。研究表明，外泌体膜中胆固醇含量的增加增强了其与靶细胞膜的相互作用，促使外泌体通过膜融合而非内吞途径进入细胞，降低了溶酶体降解的限制。同时，分子模拟研究显示，富含胆固醇的外泌体具有更强的膜变形能力，能够扩大其与细胞膜的接触面积，从而通过膜融合机制将小干扰RNA（siRNA）直接高效递送至细胞质内。体外实验中，富含30%胆固醇的牛奶外泌体（30% Chol/MEs）递送了PLK1 siRNA，下调了PLK1 mRNA和蛋白表达水平，诱导了肿瘤细胞凋亡，且其效果优于传统的转染试剂Lipo 2000和RNAiMAX。进一步，体内实验证实，30% Chol/MEs/siPLK1通过口服或静脉注射方式，在小鼠结直肠肿瘤模型中均能够有效抑制肿瘤生长，展现了其作为基因治疗载体的潜力[强]『前沿科技 | 中科院科学家等合作研究揭示胆固醇在外泌体递释RNA药物中的作用』前沿科技 | 中科院科学家等合作研究揭示胆固...

Lipo2K转染秘籍𐟔劣## 转染前的准备工作 𐟧ꊧ𛆨ƒž铺板密度：这个可是关键！根据Lipofectamine 2000（Lipo2K）的说明书，不同孔板的铺板密度有不同的建议。我用的是12孔板，铺板密度是2㗱05cells/孔。大概培养20小时后，细胞密度可以达到60-70%。转染前一定要检查细胞的生长状态，浓度最好在60-70%之间。太稀的话，转染后细胞会死亡（虽然我有一篇笔记里转化效率高，但因为细胞密度低，结果部分细胞死了）；太浓的话，转染试剂无法有效输送到每个细胞中。铺板的均匀度：这个对我来说是个难题。底部细胞密集而四周稀疏会影响转染效果。我最近发现一个有效的方法，就是把稀释好的细胞悬液充分混匀，加入孔板后不要晃动，静置5-10分钟。这样铺出来的板子特别均匀！不过我只在24孔板和12孔板这样试过，96孔板可能还是需要敲打一下。培养时间：铺完板子后大约16-24小时就可以做转染了，注意观察细胞状态。培养基是否含抗生素：说明书建议使用不含抗生素的培养基铺板，但对于293T细胞来说，含抗生素的培养基也可以使用。质粒DNA转染 𐟌€ 准备质粒：这个过程一定要保证卫生！质粒的量：根据说明书给出的建议质粒用量和Lipo2K用量，实际用量可以根据需求调整。制备复合物（以12孔为例）：使用50 不含血清的Opti-MEM I培养基（或其他不含血清的培养基）稀释1ug DNA。轻轻混匀。使用前轻轻混匀Lipo2K，然后取4在50  Opti-MEM I培养基中稀释。混合（1）和（2）（总体积=100）。轻轻混匀并在室温下孵育15-20分钟（溶液可能变得浑浊）。注意：Lipo2K加入后会开始产生纳米球，应尽快将稀释好的Lipo2K加入混匀的质粒中。将100 复合物轻轻添加至含有待转染细胞的孔中。通过轻柔的摇动平板轻轻混匀。培养基可在4-6小时后更换（换液有助于减少Lipo2K转染导致的细胞毒性，对于293T细胞，不换也可以）。将培养板放回细胞培养箱即可。18-48小时可见GFP表达。希望这些步骤能帮到你，祝你实验顺利！𐟚€

KKV零食攻略：不到10元美味大搜罗探索KKV，一个拥有超过2000种产品的宝藏生活馆，这里不仅是购物的天堂，更是治愈心灵的圣地。位于随州万达广场的这家店，以其明亮的黄色调和大大的KKV招牌，成为了随州的新地标。 𐟏 店名：KKV（随州万达广场主力店） 𐟓 地址：编钟大道万达广场一楼w-01号在这里，你可以找到来自世界各地的零食，以及那些童年记忆中的网红零食。以下是KKV的必买零食清单，每一款都让人心动不已： 𐟌Ÿ 熊裤马ⷦ豨Š𑨙𞧉‡ - 9.9元 𐟌Ÿ 波板糖、棉花糖 - 5.9元 𐟌Ÿ 理本ⷩ…𘩆’梅西味糖 - 14.9元 𐟌Ÿ 每日宜蕉ⷩ晨•‰脆片 - 5.9元 𐟌Ÿ 土斯蔬菜味饼干 - 7.9元 𐟌Ÿ Tango草莓脆米夹心 - 6.9元 𐟌Ÿ 日清可可味脆派 - 15.9元 𐟌Ÿ Pocky奶油曲奇味 - 8.9元 𐟌Ÿ 思一酷ⷥŽŸ味酱油点心片 - 5.9元 𐟌Ÿ 波路梦豆乳威化 - 29.9元 𐟌Ÿ 星七黑加仑草莓燕麦饼干 - 9.9元 𐟌Ÿ 樱太郎红丝绒饼干 - 9.9元 𐟌Ÿ 单身粮ⷨ�‘Š爆辣味薯片 - 8.9元 𐟌Ÿ 单身粮ⷦ—奼青芥味薯片 - 8.9元 𐟌Ÿ 威塔娜牛奶饼干 - 4.9元 𐟌Ÿ 皇族和风麻薯 - 13.9元 𐟌Ÿ mⅸ脆脆条香辣鸡味 - 3.9元 𐟌Ÿ 北田玄米米卷 - 13.9元 𐟌Ÿ 多乐多滋ⷧƒ秃䥑𓧎‰米片 - 7.9元 𐟌Ÿ Thaya冻干糯米芒果 - 13.9元 𐟌Ÿ 小老板脆紫菜 - 9.9元 𐟌Ÿ 迪兰塔ⷷ2%可可黑巧克力 - 17.9元 𐟌Ÿ Lipo榴莲面包干 - 16.9元 𐟌Ÿ 新巧风鸡蛋布丁 - 12.9元 𐟌Ÿ Dobby爆浆椰子软糖 - 9.9元 KKV的零食区不仅是零食控的天堂，也是追剧、宅在家里的绝佳伴侣。快来KKV，探索更多美味的零食吧！

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